黃花風(fēng)鈴木的組培快繁技術(shù)

　　黃花風(fēng)鈴木（ Tabebuia chrysantha ）為紫葳科風(fēng)鈴木屬落葉喬木，原產(chǎn)墨西哥、中美洲、南美洲，現(xiàn)分布在世界熱帶地區(qū)，在我國(guó)華南地區(qū)和西南地區(qū)均有引種，引種十幾年來(lái)，已被廣泛應(yīng)用于華南地區(qū)園林、庭院綠化，是良好的園林綠化與行道樹(shù)種。黃花風(fēng)鈴木會(huì)隨四季變換不同的彩衣，具有春華、夏實(shí)、秋綠、冬枯的獨(dú)特風(fēng)韻及呈現(xiàn)出良好的景觀效果，其花期在春季，花先葉開(kāi)放，花冠風(fēng)鈴狀，盛開(kāi)時(shí)滿樹(shù)金黃，頗為壯觀，具有佳的觀賞價(jià)值。在我國(guó)南方的廣東、海南等省多用作行道樹(shù)、庭院樹(shù)以及園林樹(shù)種。木材可用于制造家具和樂(lè)器，樹(shù)皮具有重要的藥用價(jià)值；黃花風(fēng)鈴木生長(zhǎng)速度中等，耐熱、耐旱、耐瘠、抗污染、萌芽力強(qiáng)、易移植，不僅可以美化環(huán)境，而且具有良好的經(jīng)濟(jì)效益，是值得推廣和應(yīng)用的良好景觀樹(shù)種。

　　黃花風(fēng)鈴木的常規(guī)繁殖方式為播種育苗，但其種子壽命短，很容易喪失活力，需要即采即播，其種子成熟期在 4~5 月。因此，用種子繁殖受季節(jié)性限制，難以滿足市場(chǎng)的需求。而通過(guò)組織培養(yǎng)的方式進(jìn)行苗木繁殖，其繁殖速度快，苗木質(zhì)量好，可達(dá)到苗木規(guī)�；a(chǎn)的目的。目前，國(guó)內(nèi)利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖黃花風(fēng)鈴木的有關(guān)研究少，公開(kāi)的只有 2 項(xiàng)相關(guān)的發(fā)明專利，或其中 1 項(xiàng)（“一種黃花風(fēng)鈴木組織培養(yǎng)快速繁殖方法”CN201710170198.1）也是筆者所擁有的所有權(quán)專利。筆者根據(jù)試驗(yàn)研究總結(jié)了黃花風(fēng)鈴木的組培快繁技術(shù)，旨在提供一種實(shí)用、有效的育苗途徑，為實(shí)現(xiàn)黃花風(fēng)鈴木的快速繁殖提供理論依據(jù)。

　　1 無(wú)菌苗的獲取

　　1.1 外植體的選取及處理

　　選擇黃花風(fēng)鈴木的種子作為外植體。由于黃花風(fēng)鈴木的果實(shí)成熟后會(huì)自然裂開(kāi)，種子易隨風(fēng)飄散，所以應(yīng)在果實(shí)成熟而未開(kāi)裂前，即由綠轉(zhuǎn)變成黃褐色時(shí)，及時(shí)采收，采收后曬干果實(shí)，等果莢自然開(kāi)裂后抖出種子，并陰干。剝?nèi)ネ鈱臃N殼，取種仁，在超凈工作臺(tái)上以 0.1% HgCl 2 溶液消毒 8~10min，再用無(wú)菌水清洗4~5 次，瀝干水分。

　　1.2 初始培養(yǎng)

　　將已消毒處理好的種子接種至初始培養(yǎng)基上，初始培養(yǎng)基為 MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+ 蔗糖30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接種后暗培養(yǎng) 5d，再移至自然光照條件下培養(yǎng) 20d，培養(yǎng)溫度為 25±2℃。暗培養(yǎng) 5d 后種子開(kāi)始萌動(dòng)，在自然光照條件下繼續(xù)培養(yǎng) 5d 即可長(zhǎng)出小苗，20d 無(wú)菌小苗可長(zhǎng)至約 4cm 高。

　　2 不定芽的分化及增殖培養(yǎng)

　　2.1 不定芽的分化

　　將初始培養(yǎng)獲得的無(wú)菌苗剪切成長(zhǎng)約 2cm的帶腋芽節(jié)段，接種到芽分化培養(yǎng)基上，芽分化培養(yǎng)基為MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸25mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接種時(shí)將帶腋芽節(jié)段斜插在培養(yǎng)基上，接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)弱光條件下培養(yǎng)，光照較弱可促進(jìn)不定芽的分化。培養(yǎng)溫度 25±2℃，光照強(qiáng)度 1000~1500Lx，每天光照12~14h，培養(yǎng) 20d 左右在腋芽處可分化出小芽。此時(shí)，將培養(yǎng)材料移到光照強(qiáng)度稍強(qiáng)的地方繼續(xù)培養(yǎng)，光照強(qiáng)度 2000~3000Lx，在培養(yǎng)溫度和光照時(shí)間不變的條件下，適當(dāng)提高光照強(qiáng)度可促進(jìn)已分化的小芽長(zhǎng)高。

　　2.2 不定芽的增殖

　　待分化出的小芽長(zhǎng)到 2cm 以上時(shí)，再將小芽切下，剪成帶腋芽的小段，轉(zhuǎn)接至芽增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng)，每隔 30d 左右轉(zhuǎn)接 1 次。芽增殖培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件與芽分化培養(yǎng)相同，但隨著增殖代數(shù)的增加，需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)情況適當(dāng)調(diào)整培養(yǎng)基配方或培養(yǎng)條件，以保證繼代苗正常生長(zhǎng)，增殖系數(shù)達(dá) 3.0 以上。

　　3 生根培養(yǎng)及煉苗

　　3.1 生根培養(yǎng)

　　剪取生長(zhǎng)健壯，長(zhǎng) 3cm 以上的繼代苗接種至生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為 1/4MS+IBA1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8，生根培養(yǎng)的無(wú)機(jī)鹽濃度降低為 1/4MS 更有利于黃花風(fēng)鈴木誘導(dǎo)生根。接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)，在根原基誘導(dǎo)的第一階段需進(jìn)行一定時(shí)間的暗培養(yǎng)，有利于誘導(dǎo)生根。培養(yǎng) 12d 后小苗的基部切口處開(kāi)始膨大長(zhǎng)出愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng) 5d 后從愈傷組織處長(zhǎng)出白色的根，生根率達(dá) 92%以上。然后移到弱光條件下繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為 25±2℃，光照強(qiáng)度1000~1500Lx，每天光照 12~14h。

　　3.2 煉苗

　　生根培養(yǎng) 25d 后，待小苗的根系基本長(zhǎng)齊，將生根瓶苗移至煉苗棚進(jìn)行煉苗，煉苗時(shí)間為 10d。煉苗棚必須采光良好，并配備有遮陽(yáng)網(wǎng)，隨時(shí)可以調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。在剛從培養(yǎng)室移到煉苗棚的最初幾天，常需要適當(dāng)遮蔭，以防強(qiáng)光灼傷幼苗，待小苗慢慢適應(yīng)室外的環(huán)境后再加強(qiáng)光照，使組培生根苗木質(zhì)化程度逐漸增強(qiáng)，更能適應(yīng)移栽后的生長(zhǎng)環(huán)境。

　　4 生根苗移栽

　　4.1 育苗基質(zhì)準(zhǔn)備

　　育苗基質(zhì)好壞常常是能否移栽成活和幼苗生長(zhǎng)的關(guān)鍵。黃花風(fēng)鈴木對(duì)土壤要求不嚴(yán)格，喜疏松肥沃、排水良好、富含有機(jī)質(zhì)的中性至微酸性壤土。因此，育苗基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1（體積比），將 3 種基質(zhì)混合均勻，分裝到育苗營(yíng)養(yǎng)袋，然后擺放于育苗托上，再用 0.2%高錳酸鉀溶液對(duì)育苗基質(zhì)進(jìn)行消毒，消毒后用清水將基質(zhì)淋透，置于溫室育苗棚內(nèi)備用。

　　4.2 生根苗移栽

　　將經(jīng)過(guò)煉苗的生根苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水輕輕地洗去小苗根系上附著的培養(yǎng)基，注意不要損傷根系和莖葉。移栽時(shí)先用鑷子在育苗營(yíng)養(yǎng)袋的基質(zhì)挖 1個(gè)小穴，然后將洗干凈的生根小苗移栽至小穴內(nèi)，再用手輕輕將基質(zhì)壓一下，然后要淋透水，用薄膜覆蓋以保溫保濕。

　　4.3 移栽后管理

　　4.3.1 溫濕度控制。在生根苗移栽初期，光照不能過(guò)強(qiáng)或過(guò)弱，可以用遮陽(yáng)網(wǎng)適度遮蔭，還要經(jīng)常噴霧澆水，保持環(huán)境相對(duì)濕度在 85%以上。保持溫室育苗棚溫度在 20~25℃，不宜過(guò)高，因?yàn)楦邷馗邼竦沫h(huán)境易使小苗感病死亡，一般是較低的氣溫有利于緩苗。緩苗后（有初生新葉出現(xiàn)）逐步揭開(kāi)薄膜適度通風(fēng)，直至完全揭開(kāi)。

　　4.3.2 病害防治和水肥管理。每周噴施 1 次殺菌劑，殺菌劑一般用甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅等抗菌藥，預(yù)防病害的發(fā)生，幾種殺菌劑可以交替使用，避免病菌產(chǎn)生抗藥性。移栽后 30d，隨著小苗的生長(zhǎng)，進(jìn)入后期管理，此時(shí)可在陰天時(shí)將苗木移出溫室育苗棚進(jìn)行苗木常規(guī)管理。主要是淋足水，保持 60%~80%的相對(duì)濕度，定期施肥、噴農(nóng)藥。

　　5 結(jié)語(yǔ)

　　（1）以黃花風(fēng)鈴木的種子作為外植體比較方便消毒，更容易獲得無(wú)菌材料。消毒前需剝?nèi)ネ鈱臃N殼，由于里面的種仁受外界污染少，因此消毒起來(lái)比較簡(jiǎn)單，外植體污染率低。同時(shí)，種子要隨采隨用，避免因儲(chǔ)存過(guò)久影響種子的活力而降低種子的萌芽率。

　�。�2）黃花風(fēng)鈴木不定芽的誘導(dǎo)和分化可以用同一種培養(yǎng)基，適合不定芽誘導(dǎo)和分化的培養(yǎng)基為 MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸 25mg/L+蔗糖 30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。在增殖培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)材料容易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中添加 L-半胱氨酸可以較好地控制材料在培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的褐化現(xiàn)象，提高不定芽的分化率；同時(shí)，隨著增殖代數(shù)的增加，要注意激素的累積對(duì)培養(yǎng)材料生長(zhǎng)的影響，需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生產(chǎn)情況隨時(shí)適當(dāng)調(diào)整激素的用量。

　�。�3）黃花風(fēng)鈴木組培苗生根相對(duì)比較困難，經(jīng)過(guò)多次調(diào)試，發(fā)現(xiàn)降低培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽濃度和蔗糖用量對(duì)其生根更有利。一般來(lái)說(shuō)，生根培養(yǎng)基的鹽離子濃度和糖濃度均低于增殖培養(yǎng)基，降低無(wú)機(jī)鹽濃度可提高大多數(shù)植物的生根能力。適合的生根培養(yǎng)基為1/4MS+IBA 1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8。

　　（4）生根苗在移栽前需進(jìn)行煉苗，增加小苗的木質(zhì)化程度，對(duì)移栽成活更有利。移栽時(shí)基質(zhì)的選擇也很關(guān)鍵，黃花風(fēng)鈴木喜疏松肥沃、排水良好、富含有機(jī)質(zhì)的中性至微酸性壤土，生根苗移栽在溫室大棚內(nèi)進(jìn)行，溫室大棚內(nèi)的溫度比較高，水分蒸發(fā)量比較大，而泥炭土持水量大和保水性能好為植物生長(zhǎng)提供一個(gè)更適合的環(huán)境，再添加適量黃泥土和河沙，可以提高基質(zhì)中的有機(jī)質(zhì)和增強(qiáng)其透氣性。移栽基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1（體積比）較好，移栽成活率較高。