組培甘薯脫毒與快速繁殖技術(shù)

　　1.無菌體系的建立

　　1）外植物的選取、滅菌和接種

　　選擇適宜當(dāng)?shù)卦耘嗟母弋a(chǎn)優(yōu)質(zhì)或用途特殊的甘薯品種植物作為母株，取枝條，剪去葉片后切成數(shù)段。每段帶一個腋芽，含頂芽的2-3節(jié)。

　　剪好的莖段流水?dāng)?shù)分鐘后。用濾紙吸干表面水分后70%酒精中浸泡10s，在用0.1%升汞溶液消毒10min，用無菌水沖洗5次；或用10%次氯酸鈉溶液消毒15min，用無菌水沖洗3次。

　　把消毒好的芽放在立體顯微鏡下，無菌削去丁芽和腋芽上較大的幼葉，切去0.3-0．5mm含1～2個葉原基的莖尖組織，接種在培養(yǎng)基上。

　　2）培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件

　　甘薯莖尖培養(yǎng)較理想的培養(yǎng)基為MS+IAA0，1一0，2mg/L+6-BA0．1一0．2mg/L+3％蔗糖，pH值為5．8～6，0。若添加GA3().05mg/L，對莖尖的生長和成苗會有更好的促進(jìn)作用。培養(yǎng)條件以溫度25～28℃，光照強(qiáng)度巧00、2000lx，光照14h/d為宜。

　　2，初代培養(yǎng)

　　不同品種的莖尖生長情況有差異。一般培養(yǎng)10d莖尖膨大并轉(zhuǎn)綠，培養(yǎng)20d左右莖尖形成2～3mm的小芽點，且在基部逐漸形成綠色愈傷組織。此時應(yīng)將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)人無激素的MS培養(yǎng)基上，以阻止愈傷組織的繼續(xù)生長，使小芽生長和生根。芽點基部少量的愈傷組織對莖尖生長成苗有促進(jìn)作用，但愈傷組織的過度生長對成苗則非常不利，且有明顯的抑制作用。

　　3．初級快速繁殖

　　當(dāng)薯苗長至3～6cm高時，將小植株切段進(jìn)行短枝扦插，除頂芽一般帶有]、2片展開葉片外，其余的切段都是具一節(jié)一葉的短枝·切段直插于三角瓶內(nèi)無植物生長物質(zhì)的MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件同莖尖培養(yǎng)。2～3d內(nèi)，切段基部即產(chǎn)生不定根，30d后長成具有6、8片展開葉的試管。

　　4．脫毒苗快速繁殖

　　試管苗經(jīng)嚴(yán)格檢測確認(rèn)為脫毒苗后，可進(jìn)行試管切段快速繁殖。試管繁殖脫毒苗一般30、40d為一個繁殖周期，一個腋芽可長出5片以上的葉，繁殖系數(shù)約為5。為降低人工培養(yǎng)的成本，可用食用白糖代替蔗糖；將培養(yǎng)基中的大量元素減半，甚至用I/4MS（大量元素）培養(yǎng)基；盡可能利用自然光照培養(yǎng)；也可用經(jīng)檢驗合格的自來水代替蒸餾水或無離子水。

　　5@試管苗馴化栽

　　l)試管苗馴化移栽

　　取株高達(dá)到3～5cm的健壯苗，將瓶塞打開，置室溫和自然光照下鍛煉2～3d，使幼苗逐漸適應(yīng)外界環(huán)境條件。移栽時倒人一定量的清水，振搖后松動培養(yǎng)基，小心取出幼苗，洗去根部的培養(yǎng)基以防雜菌滋生，再移至滅菌的蛭石或沙性土壤中。待苗生根、長出新葉后再移植于土壤中，有利于苗的快速生長·

　　2）試管苗馴化移栽管理

　　基質(zhì)溫度是根系成活的關(guān)鍵，但不宜過濕·應(yīng)維持良好的通氣條件，促使根生長�？諝庖矐�(yīng)保持濕潤，以防試管苗失水枯死·移栽初期，可用塑料薄膜覆蓋·溫度以25～30℃為宜，并注意遮陽，避免日曬·脫毒苗繁育雖在防蟲網(wǎng)內(nèi)進(jìn)行，但有時會因封閉不嚴(yán)或土內(nèi)自生性出蚜，而導(dǎo)致網(wǎng)內(nèi)有蚜蟲等現(xiàn)象發(fā)生，或者出現(xiàn)地下害蟲危害。為此，應(yīng)定期噴灑農(nóng)藥，防治病蟲害。

　　6．適時定植

　　蛭石缺乏植物生長必需的營養(yǎng)，故當(dāng)薯苗成活后，應(yīng)及時植于防蟲網(wǎng)內(nèi)已消毒的土壤中，促使其生長·為提高網(wǎng)室利用率，定植的薯苗應(yīng)適當(dāng)密植·采取剪秧打插、以苗繁苗的方式，可在短期內(nèi)得到數(shù)量巨大的脫毒苗。在北方，為克服冬、春溫度過低的影響，可建立防蟲溫室，并輔以取暖升溫措施，保證脫毒全年進(jìn)行繁育。以此法繁育的薯苗在防蟲網(wǎng)內(nèi)所結(jié)薯塊即為原原種薯。