組培實驗室培養(yǎng)方式和培養(yǎng)條件

　　花藥的培養(yǎng)主要有三種：一是在瓊脂固化培養(yǎng)基表面培養(yǎng)，二是在加入30%Ficoll的液體培養(yǎng)基表面漂浮培養(yǎng)，三是利用固態(tài)液體雙層培養(yǎng)基培養(yǎng)，以便既能保持較高的接種密度，培養(yǎng)基又不易失水干涸。

　　花藥對培養(yǎng)溫度的要求因物種而不同，對于大多數(shù)小麥品種來說，在培養(yǎng)的最初6d給以30、32℃的較高溫度，然后再轉(zhuǎn)人28、30·c下培養(yǎng)，花藥出愈率會有明顯提高。水稻花藥培養(yǎng)的適宜溫度從一開始就是27·C。愈傷組織分化階段對溫度的要求不像誘導(dǎo)階段那樣嚴格，例如小麥在17℃和30℃下花粉愈傷組織分化頻率沒有顯著差異，水稻花粉植株的分化也多在和誘導(dǎo)期間相同的溫度下進行。

　　對光照的要求在物種間差異更為明顯，例如連續(xù)光照可顯著增加煙草花粉胚的產(chǎn)量，卻強烈抑制曼陀羅的花粉胚胎發(fā)生。禾谷類植物在花粉愈傷組織誘導(dǎo)期間則以暗培養(yǎng)或散射光培養(yǎng)效果較好，強光會抑制小麥花粉愈傷組織的形成。愈傷組織的分化原則上都應(yīng)在光照下進行，但對光照強度和照光時間的要求則因物種而異。例如水稻花粉愈傷組織在轉(zhuǎn)人分化培養(yǎng)基之初仍不宜照光培養(yǎng)，須待3～5d后再給以每天14h1000～2000lx的光照，以免引起愈傷組織的老化壞死。對小麥花粉植株則不宜給以長日照。